對于大多數(shù)生物研究人員來說，細胞培養(yǎng)、細菌培養(yǎng)、提取核酸等。都是實驗室，實驗操作費時費力，過程中可能會遇到各種坑。今天我們要講的是如何讓你的核酸 extraction不再煩惱！

核酸分為脫氧核糖核酸( DNA)和核糖核酸( RNA)。它是由許多核苷酸單體聚合而成的生物大分子化合物，是生命最基本的物質(zhì)之一。分別提取核酸 is DNA extraction和RNA extraction。兩種方法的提取原理大致相同。簡單來說就是分兩步:細胞或組織裂解和核酸 純化。

核酸 extraction 純化常用的方法有酚/氯(lü)仿萃取法、離心柱法、磁珠法等。

1、酚/氯(lü)仿萃取法

B (xi)烯丙基氯(lü) DNA的仿提取是用苯酚作為蛋白質(zhì)變性劑，反復提取，使蛋白質(zhì)變性，用SDS(十二烷基磺酸鈉)裂解細胞膜，在蛋白酶K和EDTA存在下消化蛋白質(zhì)或多肽或小肽分子，使核蛋白變性降解，使DNA不含核蛋白。

苯酚/氯(lü)模擬萃取法的優(yōu)點是成本低，對實驗條件要求低。這種方法的缺點也很明顯:由于使用了苯(芬)酚、氯(呂)仿等有機試劑，毒性較高，長期操作對人員健康影響較大；而且核酸的回收率低，損耗大。

離心柱純化

以DNA萃取離心柱為例。離心柱結(jié)構主要是一種特殊的硅基質(zhì)吸附材料，可以特異性吸附DNA，而RNA和蛋白質(zhì)會通過。該方法可選擇性吸附核酸，而不吸附蛋白質(zhì)和鹽，從而實現(xiàn)核酸與蛋白質(zhì)和鹽的分離，是目前試劑盒提取廣泛采用的方法。

該方法受人為操作因素影響較小，提取的DNA純度穩(wěn)定性很高。此外，離心柱法提取的DNA純度高于傳統(tǒng)酚氯(lü)模擬法提取的DNA純度。離心柱法以其低廉的價格和相對方便的操作，逐漸取代了傳統(tǒng)的DNA萃取法，被高校、科研院所等市場普遍接受。

這種方法的缺點是需要的樣本較多，但不適合稀有樣本。當樣品過量時，需要反復離心，樣品提取效率低，不便于高通量和自動化操作。這與現(xiàn)代生物實驗，特別是基因診斷、疾病檢測和轉(zhuǎn)基因檢測領域的高通量和自動化的要求不相適應。離心柱法DNA萃取需要大量的操作人員和儀器。當面對突發(fā)疫情時，更需要有高通量DNA提取設備和方法，更有效、更準確地監(jiān)測和控制疫情。

磁珠法

磁珠法是一種分離純化固體載體(SPRI)的可逆固定化方法。主要原理是:在不同濃度的PEG(聚乙二醇；；聚乙二醇)、不同片段大小的DNA會吸附在磁珠的羧基修飾層上，這些DNA可再次溶于水洗脫回收。

實驗中使用的磁珠分為五層，從里到外依次為:核為聚苯(xi)烯材料、超順磁材料(主要是四氧化三鐵)、第二層聚苯(xi)烯材料、第二層超順磁材料和表面粗糙的羧基修飾層。粗糙的表面更有利于核酸與羧基改性層的結(jié)合。該方法是將純化介質(zhì)包覆在納米級磁珠表面，DNA被介質(zhì)吸附，DNA附著在磁珠上，在外磁場的作用下定向移動，使核酸與其他物質(zhì)分離。

與其他集中式方法相比，磁珠法具有無可比擬的優(yōu)勢，包括:

(1)提取靈敏度高，只需少量樣品即可提取核酸；

(2 )/ kloc-6/純度高，磁珠與核酸的特定組合能使核酸與雜質(zhì)充分分離，使得提取的核酸純度高、濃度高；

(3)可以實現(xiàn)自動化和批量操作，通過機器自動化完成操作，人力較少，同時可以完成多個樣品的批量操作。以32孔核酸自動提取器為例，一個樣本的提取時間最多可用于處理32個樣本，滿足了生物學高通量運行的要求，能夠在傳染病爆發(fā)時快速及時地做出反應。

(4)操作簡單，時間短。整個提取過程只有四步。根據(jù)儀器不同，部分儀器提取時間可縮短至30分鐘，大大提高了實驗效率。

(5)安全無毒，不使用傳統(tǒng)方法中的苯、氯(lü)仿等有毒試劑，*大限度減少對實驗操作人員的傷害，完全符合現(xiàn)代環(huán)保理念；

近年來，磁珠法已經(jīng)成為核酸提取的必備工具之一，成為核酸自動提取設備的必備部件之一。Automatic 核酸 extractor對于經(jīng)常用大量實驗樣本做實驗的實驗人員來說是個不錯的選擇。而且對于各種核酸，無論是質(zhì)粒DNA，基因組DNA，還是RNA，一個自動化的核酸提取器就可以滿足實驗者的提取要求。

目前全自動核酸提取器基本可以滿足核酸的大批量提取的需要，針對不同的樣本(如全血、質(zhì)粒、培養(yǎng)細胞、組織等。)和核酸 types(基因組DNARNA/)